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南林蔡旭敏和港中深唐本忠院士團(tuán)隊(duì) Adv. Sci: 天然受體香豆素紅光BioAIE通過壽命成像監(jiān)測活細(xì)胞中Cu2?濃度
2023-12-20  來源:高分子科技

  南京林業(yè)大學(xué)蔡旭敏副教授和香港中文大學(xué)(深圳)唐本忠院士、趙征教授合作,將天然受體香豆素定向轉(zhuǎn)化為具有紅色發(fā)光的生物基聚集誘導(dǎo)發(fā)光(BioAIE)分子并應(yīng)用于壽命成像。相關(guān)成果以Natural Acceptor of Coumarin-Isomerized Red-Emissive BioAIEgen for Monitoring Cu2+ Concentration in Live Cells via FLIM為題發(fā)表于Advanced Science》。


  石油基聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料(AIEgen)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用引人矚目,但受到結(jié)構(gòu)較單一和不可再生等問題的困擾。純天然AIEgen獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和天然可再生可以彌補(bǔ)這些缺陷,但由于固定的結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其性能難以設(shè)計(jì)和調(diào)節(jié)。因此,由豐富的生物質(zhì)中衍生制備AIEgenBioAIEgen)是一種合理的方法,整合了合成和純天然AIEgen的雙邊優(yōu)勢Nat. Commun2023, 14, 6076; Nat. Commun2021, 12, 1773; Natl. Sci. Rev2023, 10, nwad233)(圖1)。近期,蔡旭敏副教授等利用香豆素的內(nèi)酯結(jié)構(gòu)作為大量存在的天然受體,結(jié)合具有螺旋槳結(jié)構(gòu)和給電子特性TPA基團(tuán)構(gòu)建了兩種具有AIE特性的D-π-A型異構(gòu)體。其中,對位取代的Cm-p-TPA可發(fā)生酮式(keto)結(jié)構(gòu)下的電荷轉(zhuǎn)移(CT)過程,發(fā)射600 nm的紅光;Cm-p-TPA良好的生物相容性及特異性識別Cu2+等特性,利用FLIM將其成功應(yīng)用于HeLa細(xì)胞內(nèi)線粒體自噬過程中Cu2+濃度的監(jiān)測(圖2。該研究利用位置異構(gòu)策略來調(diào)控香豆素基BioAIE分子性能并應(yīng)用于生物應(yīng)用,證明了生物質(zhì)原料衍生化構(gòu)筑BioAIE的研究思路是合理可行的。 


1. 源自生物質(zhì)的BioAIEgen的綜合優(yōu)勢 


2香豆素天然受體異構(gòu)化制備紅色發(fā)射BioAIEgen,通過FLIM用于監(jiān)測活細(xì)胞中的Cu2+濃度


  香豆素是一種常見的天然產(chǎn)物,其微弱的藍(lán)紫色熒光不適用于實(shí)際應(yīng)用。但其內(nèi)酯結(jié)構(gòu)被認(rèn)為是少有的天然受體,可用于構(gòu)建D-π-A型紅BioAlEgen。他們通過在π橋的不同位置引入TPA,得到了具有不同CT性能的香豆素基BioAIEgen,且其水楊醛席夫堿結(jié)構(gòu)可作為金屬離子的結(jié)合位點(diǎn),有作為探針的潛力(3a)。


  銅離子在線粒體生物合成和呼吸鏈中起著重要作用。線粒體自噬是一種細(xì)胞間自我更新的過程,選擇性地消除多余或受損的線粒體,會導(dǎo)致銅離子濃度的變化。然而,據(jù)他們所知,目前還沒有關(guān)于線粒體自噬過程中銅離子濃度變化的報(bào)道。傳統(tǒng)的基于強(qiáng)度的探針會受其濃度依賴特性和細(xì)胞攝取染料的程度的限制,相比之下,熒光壽命成像顯微鏡(FLIM)方法因其高分辨率和對細(xì)胞微環(huán)境的敏感性,且不受染料濃度的影響而受到廣泛關(guān)注。因此,將上述具有良好生物相容性和紅色熒光的香豆素BioAlEgen作為特定的銅離子探針,結(jié)合FLIM方法,預(yù)期實(shí)現(xiàn)在線粒體自噬過程中對銅的監(jiān)測和可視化 (3b)。 


3(a)香豆素衍生BioAIEgens的分子設(shè)計(jì)。(b)基于Cm-p-TPAFLIM監(jiān)測細(xì)胞線粒體自噬過程中Cu2+濃度變化圖。與“turn on”型傳感器相比,FLIM特別適合turn off”型傳感器


  光物理數(shù)據(jù)分析表明香豆素結(jié)構(gòu)確實(shí)可以作為天然受體構(gòu)建D-π-A分子,并且位置異構(gòu)對激發(fā)態(tài)質(zhì)子轉(zhuǎn)移(ESIPT)和CT過程都有顯著影響。鄰位取代的Cm-o-TPA在烯醇式結(jié)構(gòu)下(enol表現(xiàn)出CT,而對取代的Cm-p-TPAketo結(jié)構(gòu)下表現(xiàn)出CT,后者導(dǎo)致紅光發(fā)射(圖4。且對位取代的Cm-p-TPACu2+的識別能力強(qiáng)于Cm-o-TPA;诖,將Cm-p-TPA F127包裹成納米顆粒NPs,應(yīng)用于監(jiān)測HeLa細(xì)胞的線粒體自噬過程,在0 ~ 20 min內(nèi)通過共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察(圖5)。在0 min時(shí),HeLa細(xì)胞線粒體和溶酶體之間的PCC較低(0.32),表明線粒體自噬過程剛剛開始。20 min后,線粒體與溶酶體之間的PCC增加到0.63,表明線粒體自噬過程完成了一半以上。在0 ~ 20 min的時(shí)間范圍內(nèi),觀察到位于溶酶體中的熒光強(qiáng)度逐漸降低。因?yàn)?/span>Cm-p-TPA NPs明顯的化學(xué)和光穩(wěn)定性,因此這些結(jié)果表明在線粒體自噬中釋放Cu2+。推斷Cu2+Cm-p-TPA配位,且在線粒體自噬過程中Cu2+濃度逐漸升高。溶酶體內(nèi)Cm-p-TPA NPs熒光壽命的變化(6)也顯示出相似的結(jié)果。在0 ~ 20 min內(nèi),Cm-p-TPA NPs染色的溶酶體在短壽命t1內(nèi)逐漸減少,成像顏色由黃綠色變?yōu)榫G色。另一方面,長壽命t2逐漸增加,導(dǎo)致成像顏色由淺橙色變?yōu)樯畛壬S纱丝梢姡?/span>HeLa細(xì)胞在自噬過程中,Cu2+的濃度也在逐漸增加,導(dǎo)致溶酶體成像中熒光猝滅。  


4. Cm-o-TPACm-p-TPA在純THF溶液、不同水含量(fw)THF/H2O混合物及不同極性溶劑中的光物理數(shù)據(jù)。 


5. Cm-p-TPA NPs (10 μM)監(jiān)測線粒體自噬過程。 


6. Cm-p-TPA NPs (10 μM)在饑餓誘導(dǎo)線粒體自噬過程中的壽命變化。比例尺:10.0 μm。


  文章第一作者為南京林業(yè)大學(xué)蔡旭敏副教授,共同第一作者為南京林業(yè)大學(xué)碩士研究生李守濟(jì)和香港中文大學(xué)(深圳)博士后汪文錦,通訊作者為南京林業(yè)大學(xué)蔡旭敏副教授,共同通訊作者為香港中文大學(xué)(深圳)唐本忠院士和趙征教授。


  論文題目:Natural Acceptor of Coumarin-Isomerized Red-Emissive BioAIEgen for Monitoring Cu2+ Concentration in Live Cells via FLIM

  論文作者:Xu-Min Cai,* Shouji Li, Wen-Jin Wang, Yuting Lin, Weiren Zhong, Yalan Yang, Fritz E. Kühn, Ying Li, Zheng Zhao,* and Ben Zhong Tang*

  DOI: 10.1002/advs.202307078

  原文鏈接:https://doi.org/10.1002/advs.202307078


作者簡介


蔡旭敏,南京林業(yè)大學(xué)副教授,江蘇省“雙創(chuàng)博士”,國家“雙一流”專業(yè)“林產(chǎn)化工”系副主任,于南京大學(xué)和慕尼黑工業(yè)大學(xué)獲碩士和博士學(xué)位。與“聚集誘導(dǎo)發(fā)光”創(chuàng)始人唐本忠院士團(tuán)隊(duì)長期合作,主要從事生物質(zhì)定向轉(zhuǎn)化高附加值BioAIE材料的跨學(xué)科研究。近3年內(nèi)以通訊/第一作者發(fā)表代表性SCI論文: Nature Communications, National Science Review, Advanced Science, Aggregate等。任《生物質(zhì)化學(xué)工程》期刊的青年編委。課題組鏈接:https://www.x-mol.com/groups/cai_xumin



唐本忠教授1982年獲華南理工大學(xué)學(xué)士學(xué)位,1985年、1988年先后獲日本京都大學(xué)碩士、博士學(xué)位。曾在多倫多大學(xué)從事博士后研究、日本NEOS公司中央研究所任高級研究員。1994–2021年在香港科技大學(xué)工作。2009年、2017年、2020年先后當(dāng)選中國科學(xué)院院士、亞太材料科學(xué)院院士、發(fā)展中國家科學(xué)院院士。2021年加入香港中文大學(xué)(深圳)擔(dān)任理工學(xué)院院長、校長學(xué)勤講座教授。主要從事高分子化學(xué)和先進(jìn)功能材料研究。在聚集誘導(dǎo)發(fā)光(Aggregation-Induced Emission, AIE)這一化學(xué)和材料前沿領(lǐng)域取得了原創(chuàng)性成果,是AIE概念的提出者和AIE研究的引領(lǐng)者。已發(fā)表學(xué)術(shù)論文2,000多篇,總引用超180,000次,h因子為187。在學(xué)術(shù)會議上作了500多場邀請報(bào)告,擁有100多項(xiàng)授權(quán)專利,F(xiàn)任德國Wiley出版社發(fā)行的Aggregate《聚集體》雜志主編以及20多家國際科學(xué)雜志顧問、編委或客座編輯等。2014年至今連續(xù)當(dāng)選全球材料和化學(xué)雙領(lǐng)域“高被引科學(xué)家”。2007年獲Croucher基金會高級研究員獎(jiǎng),2012年獲美國化學(xué)會高分子材料科學(xué)與工程分會MACRO講座獎(jiǎng),2014年獲伊朗國家科技部頒發(fā)的Khwarizmi國際獎(jiǎng),2015年獲廣州市榮譽(yù)市民稱號,2017年獲國家自然科學(xué)一等獎(jiǎng)、何梁何利基金科學(xué)與技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng),2021年獲Nano Today國際科學(xué)獎(jiǎng),2023年獲生物材料全球影響力獎(jiǎng)。



趙征,香港中文大學(xué)(深圳)理工學(xué)院助理教授,校長青年學(xué)者,國家海外高層次青年人才、中國人體健康科技促進(jìn)會臨床微生物與感染精準(zhǔn)專業(yè)委員會常務(wù)委員,中國抗癌協(xié)會醫(yī)工整合專業(yè)委員會委員、中國感光學(xué)會光學(xué)傳感與診療專委會委員、深圳市分子聚集體功能材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室副主任,港中深第二附屬醫(yī)院AIE臨床轉(zhuǎn)化中心執(zhí)行副主任,香港中文大學(xué)(深圳)材料科學(xué)與工程研究生項(xiàng)目主任。獲首屆中國化學(xué)會朱道本有機(jī)固體青年創(chuàng)新獎(jiǎng)、Materials Chemistry Frontiers新銳科學(xué)家、Journal of Materials Chemistry B新銳科學(xué)家等榮譽(yù)稱號,2022-2023連續(xù)入選斯坦福大學(xué)全球前2%頂尖科學(xué)家榜單。趙征教授于中國科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所取得博士學(xué)位,后赴香港科技大學(xué)化學(xué)系進(jìn)行博士后研究,2021年加入香港中文大學(xué)(深圳)理工學(xué)院開展研究工作。當(dāng)前的研究興趣包括新型聚集體光功能材料、聚集體光敏劑及其應(yīng)用、近紅外二區(qū)材料及其應(yīng)用。已在Natl. Sci. Rev、 Nat. Commun、JACS、Angew. Chem. Int. Ed.、Matter、ACS Central Science.、Adv. Mater等國際頂級期刊發(fā)表論文90余篇,包括13篇ESI高被引論文,論文總計(jì)被引用7800余次,H-index為48。目前兼任科學(xué)出版社聚集誘導(dǎo)發(fā)光系列叢書編委,Aggregate期刊顧問編委,National Science Review期刊青年編委,Smart Molecules期刊青年青年編委,Chinese Chemical Letters 期刊青年編委,集成技術(shù)期刊青年編委,National Science Review客座編輯,Biomaterials期刊客座編輯等。

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